- Артикул:00-01052299
- Автор: Т.Т. Нго, Г. Ленхофф
- ISBN: 5-03-000191-3
- Обложка: Твердая обложка
- Издательство: МИР (все книги издательства)
- Город: Москва
- Страниц: 446
- Год: 1988
- Вес: 690 г
Развернуть ▼
Фундаментальное руководство по иммуноферментному анализу, сочетающее изложение принципов метода с подробным обсуждением практического использования его различных вариантов. Авторы отдельных разделов - исследователи, работающие в США, Канаде и Швейцарии, известны своим вкладом в разработку и применение метода; книга написана на высоком профессиональном уровне и содержит много новых данных.
Для специалистов по молекулярной биологии, биохимиков, микробиологов, биотехнологов.
Содержание
Предисловие редактора перевода
Глава 1. Введение. Т. Нго, Г. М. Ленхофф
Литература
Глава 2. Иммуноферментный анализ: общий обзор. Т. Т. Нго
Введение
Фермент-зависимые метки
Преимущества ФЗМ
Недостатки ФЗМ
Чувствительность и универсальность ферментных меток
Иммуноферментный анализ без разделения компонентов (гомогенный анализ) и с их разделением (гетерогенный анализ)
Иммуноферментный анализ без разделения компонентов (гомогенный анализ)
ИФА без разделения компонентов с использованием в качестве метки ферментов
ИФА без разделения компонентов с использованием в качестве метки модуляторов ферментов
ИФА без разделения компонентов с использованием в качестве метки простетических групп
ИФА без разделения компонентов с использованием в качестве метки флуорогенных субстратов
ИФА без разделения компонентов на основе конформационных ограничений метки-апофермента при взаимодействии антител с лигандом
ИФА без разделения компонентов с использованием "ферментных каналов"
Часть I. Иммуноферментный анализ без разделения компонентов (гомогенный анализ)
Глава 3. Определение гаптенов с помощью иммуноферментного анализа без разделения компонентов. А. Яклич
Введение
Принцип анализа
Контроль дозировки лекарственных препаратов (токсикологический анализ мочи)
Токсикологический анализ сыворотки
Контроль лекарственных препаратов
Цель
Методика анализа
Разработка ЕМIТ-методов
Конъюгаты гаптенов, обладающих лечебным действием
Оптимизация анализа
Гентамицин, нетилмнцин и снсомицнн
Тобрамицнн, амикацин и канамнцин
Характеристики анализа
Стабильность реагентов
Обработка данных
Анализ больших партий образцов
Альтернативные методы
Перспективы метода
Краткое содержание
Благодарности
Литература
Глава 4. Модуляторы ферментов как метки для иммуноанализа без разделения компонентов: иммуноанализ с помощью модуляторов ферментов. Т. Т. Нго
Введение
Принцип иммуноанализа с помощью модуляторов ферментов
Материалы и методы
Стратегия разработки ИФАМ
Получение конъюгатов [модулятор - лиганд]
Результаты
ИФАМ на основе макромолекулярных ингибиторов
ИФАМ на основе низкомолекулярного обратимого ингибитора
ИФАМ на основе низкомолекулярного необратимого ингибитора
ИФАМ на основе S-липида и S-белка рибонуклеазы
Обсуждение
Литература
Глава 5. Иммуноферментный анализ с применением в качестве метки простетических групп. Т. Т. Нго
Введение
Общие положения
Принцип ИФАПГ
Получение апоглюкозооксидазы
Получение конъюгатов FAD - Л
Синтез флавин-№-(6-аминогексил)адениндинуклеотида (аминогексил-FAD)
Синтез FAD-теофиллина
Синтез конъюгата [FAD - иммуноглобулин G человека] (FAD - IgG)
Измерение активности глюкозооксидазы
Результаты
Восстановление гологлкжозооксидазы из апоглюкозооксидазы и FAD -Л
Ингибирующее влияние антител к Л на способность FAD - Л активировать апоглюкозооксидазу
Устранение ингибирующего влияния антител на способность FAD - Л активировать апоглюкозооксидазу: конкуренция Л и FAD - Л за антитела к Л
ИФАПГ с помощью индикаторных полосок
Точность и достоверность
Вещества, мешающие определению
Обсуждение
Краткое содержание
Литература
Глава 6. Иммуноферментный анализ без разделения компонентов, основанный на использовании в качестве метки флуорогенных субстратов: определение гаптенов и макромолекул. Т. Т. Нго, Р. К. Вонг.
Введение
Общие положения
Принцип ИФАФС
Материалы и методы
Ферменты
Синтез карбоксн-производных умбеллиферил-В-D-галактозида
Синтез конъюгата флуорогенного субстрата фермента с определяемым лигандом (С-Л)
Синтез С - Л путем непосредственного связывания р-ККГ с определяемым лигандом, содержащим аминогруппу
Непрямое связывание В-ККГ с макромолекулами
Стандартные методики проведения ИФАФС
Результаты
Спектры поглощения конъюгата [флуорогеиный субстрат - определяемый лиганд до и после ферментативного гидролиза
Спектры флуоресценции конъюгата [флуорогеиный субстрат - определяемый лиганд до и после ферментативного гидролиза
Титрование антител против лиганда с помощью конъюгата [флуорогеиный субстрат - определяемый лиганд]
Конкуренция за связывание; калибровочные кривые
Точность ИФАФС
Аналитическое обнаружение и влияние разбавления образцов
Достоверность
Обсуждение результатов
Примечание
Литература
Глава 7. Иммуноанализ на основе конформацнонных ограничений, создаваемых для фермент-зависимой метки антителами. Т. Т. Нго, Г. М. Ленхофф
Введение
Материалы и методы
Результаты
Обсуждение
Литература
Глава 8. Определение макромолекул с помощью иммупоферментного анализа без разделения компонентов. Я- Гиббонз
Введение
Методы анализа с использованием В-галактозидазы и высокомолекулярного субстрата
Колориметрический иммуноанализ на основе ингибирования фермента
Турбидиметрический нммуноаналнз на основе активации фермента
Флуориметрнческий иммуноанализ на основе ингибирования фермента
Обсуждение
Иммуноанализ на основе «ферментных каналов»
Первый фермент в качестве метки Второй фермент в качестве метки Литература
Глава 9. Иммуноанализ с помощью ферментов, заключенных в липосомы. У. Дж. Литчфилд, Дж. У. Фрейтаг
Введение
Методы
Обсуждение
Примечание
Литература
Глава 10. Иммуноанализ с применением индикаторных полосок. Д. Дж. Литман
Введение
Системы генерации сигнала
Матрицы для индикаторных полосок
Материалы и методы
Материалы
Методы иммобилизации
Получение конъюгата
Измерение отражательной способности
Методика анализа и состав реагентов
Другие методы
Индикаторные полоски для качественного анализа с внутренним стандартом
Принцип и методика анализа
Система внутреннего стандарта
Концентрация антител и глюкозооксидазы
Кинетика связывания антигена
Калибровочные кривые для определения морфия
Влияние времени проявления и температуры
Помехи со стороны образцов и влияние основных компонентов образцов
Воспроизводимость и достоверность анализа
Обсуждение
Скоростной иммуноанализ с помощью ультразвука
Принцип и методика анализа
Влияние ультразвука на связывание ХГТЧ с иммобилизованными антителами
Сравнительное изучение влияния различных факторов на твердофазное связывание
Калибровочная кривая для определения ХГТЧ; клинический анализ
Обсуждение
Ферментативная иммунохроматография - неинструментальный метод количественного анализа
Принцип и методика анализа
Остроконечность фронта и краевые эффекты
Влияние концентрации антител на аналитический сигнал
Влияние концентрации конъюгата
Влияние продолжительности инкубации и температуры
Анализ цельной крови и влияние основных компонентов образцов
Стабильность калибровочной кривой
Клинические характеристики
Обсуждение
Краткое содержание и перспективы
Литература
Глава 11. Флуоресцентный иммуноферментный анализ без разделения компонентов с использованием проточно-инжекционной системы. Т. Келли
Введение
Методы
Оптимизация анализа
Выполнение анализа
Результаты
Оптимизация анализа
Характеристики иммуноанализа
Обсуждение
Краткое содержание
Благодарности
Литература
Часть II. Иммуноферментный анализ с разделением компонентов (гетерогенный анализ)
Глава 12. Иммуноферментный анализ гаптенов и антигенов с разделением компонентов (гетерогенный анализ). Д. К. Стэндифер
Введение
Методы
Конъюгация с индикаторным ферментом
Очистка антител
Подготовка носителя
Результаты
Концентрация ферментного конъюгата
Чувствительность
Иммунные циркулирующие комплексы
Обсуждение
Литература
Глава 13. Иммуноферментный анализ антител. Сеймур П. Халберт и Тсу-Минг Лин
Иммобилизация антигена на носителе
Требования к чистоте антигена
Степень очистки антител, содержащих ферментную метку
Методика анализа
Обработка результатов анализа
Время инкубации
Соотнесение с результатами других анализов
Фоновая активность
Определение антител данного класса
Специфичность реакций в методе ELISA
Диагностическое значение обнаружения антител методом ELISA
Литература
Глава 14. Амплифицированный фермент-зависимый иммуносорбционный анализ a-ELISA. Дж. Е. Батлер, Дж. X. Петерман, Т. Е. Кёртдж
I. Введение
II. Приготовление реагентов
A. Источник антиглобулинов
Б. Получение растворимого иммуноферментного комплекса (ИФК)
B. Проверка специфичности
III. Определение специфических антител в микровариантах метода ELISA
А. Адсорбция антигенов на платах для микротитрования
Б. Титрование первичных антител
В. Добавление реагентов, завершающих анализ
Г. Реакция ИФК с субстратом
IV. Особенности определения специфических антител с помощью микроварианта метода ELISA
A. Зависимость эффективности определения от связывания первичных антител
Б. Влияние аффинности и авидности антител
B. Регистрация и обработка результатов анализа
Г. Определение абсолютных количеств специфических антител
V. Другие применения метода a-ELISA
А. Анализ распределения антигена на основе метода ELISA
Б. Конкурентный иммуноферментный анализ
Краткое содержание
Литература
Глава 15. Ферментативный иммунометрический анализ с применением аффинных колонок. Дж. Уильям Фрейтаг
Введение
Основы иммунометрического анализа с применением аффинных колонок
Постановка эксперимента
Результаты и их обсуждение
Литература
Глава 16. Иммуноферментный анализ с использованием эффекта пространственных затруднений (ИФАПЗ). Альберт Кастро, Нобуо Монджи
Введение
Методы
Система ИФАПЗ для хориомаммотрошша (ХМТ)
Проведение анализа
Система ИФАПЗ для Т4
Результаты
Обсуждение результатов
Литература
Глава 17. Связывание малеимидных производных гаптенов с ферментами для использования в ИФА. Нобуо Монджи, Альберт Кастро
Введение
Методы
Иммуноферментный анализ тироксина
Иммуноферментный анализ кортизола
Иммуноферментный анализ дигоксина
Результаты и обсуждение
Литература
Глава 18. Иммуноферментный анализ с использованием дополнительно маркированных конъюгатов фермент - лиганд. Т. Т. Нго и Г. М. Ленхофф
Введение
Принцип метода
Материалы и методы
Иммобилизация авидина на аминогексил-сефарозе (АН-сефарозе)
Синтез л-малеимидобензоил-ДНФ-лизина
Получение конъюгата Р-галактозидаза - биотин]
Модификация конъюгата [биотин - В-галактозидаза] м-малеимидобен-зонл-ДНФ-лизином
Ферментативная активность
Типичные результаты
Получение модельного конъюгата [Л - Ф - Я)
Взаимодействие растворимого [Л - Ф - Я] с иммобилизованным рецептором (ИР)
Подавление ферментативной активности конъюгата (Л - Ф - Я] при связывании с антителами
Стандартная кривая: конкуренция между Л и (Л - Ф - Я) за связывание с Ат
Влияние эндогенного биотина
Обсуждение
Отличительные особенности метода
Возможности применения и модификации
Ограничения
Краткое содержание
Литература
Глава 19. Флуориметрические методы в иммуноферментном анализе. Кристин Милби
Введение
Субстраты
Оборудование
Применение
Иммуноферментный анализ с применением лазерной флуориметрин
Заключение
Литература
Глава 20. Радиально-распределительный иммуноферментный анализ. Джозеф Л. Джнгель
Введение
Материалы и методы
Оборудование
Получение реагентов
Приготовление фильтров, покрытых антителами
Получение ферментных конъюгатов
Приготовление раствора для отмывки, содержащего субстрат
Приготовление калибровочных стандартов
Методика определения
Результаты и обсуждение
Последовательный анализ: дигоксин
Конкурентный анализ: тироксин
Сэндвич-анализ: ферритин
Обсуждение
Литература
Глава 21. Разработка методов иммунохимического анализа изоферментов сердца. Р. Викс, М. Усатеги-Гомес
Введение
Сведения о лактатдегидрогеназе
Первые иммунохимические методы определения ЛДГ-1
Разработка иммунохимического анализа ЛДГ-1
Клинические исследования
Свойства креатинкиназы
Разработка простого и быстрого иммунохимического метода определения изофермента КК-МВ (тест IsomuneR СК)
Клинические испытания теста Isomune CKR
Заключение
Литература
Глава 22. Электрофоретический перенос в сочетании с иммуноферментным анализом. В. К. В. Тсанг, Д. Е. Берс, К. Хэнкок
Введение
Методы
A. Растворы
Б. Подготовительные операции на стадии ДСН-электрофореза в ПААГ
B. Методика электрофоретического переноса с последующим ИФА (ИФАЭП)
Г. Фотографирование и хранение блотов
Д. Денситометрирование
Типичные результаты
A. Различные препараты антнгена/один препарат антител
Б. Один препарат антигена/различные препараты антител
B. Пределы чувствительности метода
Обсуждение
Антигенные свойства белков после переноса
Особенности применения моноклональных антител
Типы биологических молекул, которые можно анализировать методом электропереноса
Матрицы для блота
Буферные растворы и электрические параметры при электропереносе
Общие положения, касающиеся выбора буферной системы и электрических параметров при переносе
Неспецифические взаимодействия и блокирующие их реагенты
Ферментные конъюгаты и субстраты
Заключение
Литература
Глава 23. Иммунофсрментная диагностика тропических заболеваний, вызываемых паразитами. Д. де Савиньи, Ф. Спейсер
Введение
Часть А. Иммуноферментный анализ антител
Методы
Типичные результаты
Обсуждение
Часть Б. Иммуноферментный анализ паразитарных антигенов
Методы
Типичные результаты
Обсуждение
Заключение
Благодарности
Литература
Глава 24. Использование моноклональных антител в ферментативном иммунометрическом анализе. С. И. Шнмицу, Д. С. Кабакофф, Е. Д. Севьер
Введение
Преимущества использования моноклональных антител
Ферментативный иммунометрический анализ с использованием моноклональных антител
Линейный ферментативный иммунометрический анализ
Методы
Калибровка
Расширение диапазона тестирования при работе на двух длинах волн
Двухцентровая избирательность
Визуальный ферментативный иммунометрический анализ
Получение бифункциональных моноклональных антител
Моноклональные антитела к раковым антигенам
Краткое содержание
Литература
Глава 26. Определение активности пероксидазы методом Нго - Ленхоффа (в системе МБТГ - ДМАБК). В. Д. Джиохиган
Введение
Методы
Вещества, мешающие определению
Обсуждение
Литература
Глава 26. Имыунопероксидазные методы с использованием системы авидни - биотин. Су-Минг Хсу
Введение
Применение методов на основе авидин-биотиновой системы
Принципы, лежащие в основе применения авидин-биотиновой системы
Анализ тканевых срезов с помощью МАБ-метода
Анализ тканевых срезов с помощью АБМ-метода
Основы метода АБК
Анализ тканевых срезов с помощью нммунопероксидазного АБК-метода
Преимущества авидин-биотиновых систем анализа
Применение АБК в системах анализа, отличных от иммуногнетохнмической
Фоновое и неспецифическое окрашивание
Биотинилирование белков
Заключение
Литература
Предметный указатель
Рекомендуем
