- Артикул:00801410
- Автор: Дмитриев Г.А.
- ISBN: 978-5-9518-0197-5
- Обложка: Твердый переплет
- Издательство: Бином (все книги издательства)
- Город: Москва
- Страниц: 320
- Год: 2007
Развернуть ▼
В книге представлены наиболее широко применяемые в практике методы лабораторной диагностики инфекций, передаваемых половым путем (ИППП), и ассоциированных с ними заболеваний бактериальной и вирусной этиологии: сифилис, гонорея, трихомониаз, хламидиоз, гепатиты, ВИЧ и другие.
Основное внимание уделено выбору оптимальных методологий обследования пациентов, комплексного подхода к детекции возбудителей, условий выполнения анализа, интерпретации полученных результатов исследований и ошибок, возникающих при постановке диагноза заболеваний.
Для венерологов, врачей-лаборантов, научных сотрудников, занимающихся ИППП и ассоциированными заболеваниями.
Книга будет полезна специалистам в области микробиологии, молекулярной биологии, инфекционистам и клиницистам различного профиля, а также студентам старших курсов медицинских и биологических ВУЗов, преподавателям, сотрудникам и курсантам различных кафедр и циклов факультетов последипломного образования врачей, РМАПО, других форм обучения специалистов, связанных с проблемами обследования и ведения больных ИППП и ассоциированными заболеваниями.
Введение
Многообразие инфекций, передаваемых половым путем, и ассоциированных с ними заболеваний бактериальной и вирусной этиологии, отсутствие в большинстве случаев их патогномоничности, атипичность проявлений, сочетанность и скрытый характер воспалительных процессов явились мощным стимулом для разработки новых методологий клинико-лабораторной диагностики.
Наряду с широко используемыми в практике микроскопическими и культуральными методами исследования для выявления антигена и антительного Ответа организма при внедрении патогенных возбудителей начали применяться молекулярно-биологические (ПЦР, ЛЦР, ДНК-гибридизация и др.), модификации реакции иммунофлюоресценции, иммуноферментный анализ (ИФА), Иммуноблоттинг.
Таким образом, обследование пациентов постепенно начинает основываться на высокотехнологичных методах детекции возбудителей, передаваемых половым путем, которые могут быть использованы в том числе и одновременно (т. н. мультицентрические исследования), что, естественно, сокращает сроки Получения информации о качественном и количественном составе микроорганизмов, участвующих в воспалительном процессе.
Вместе с тем колоссальный объем исследований, значительное количество Разноплановых методов, обладающих различной эффективностью (чувствительностью, специфичностью, воспроизводимостью), а также выбор локализаций для забора материала при обследовании, организационные и материальные проблемы в большинстве случаев не позволяют использовать весь комплекс Клинико-лабораторных процедур, необходимых для постановки достоверного Диагноза заболевания(й).
В этой связи на первый план выходит алгоритм обследования пациента, Другими словами, выбор наиболее оптимальных методов, позволяющих в кратчайшие сроки и с минимальными затратами установить адекватный диагноз. Эта задача в большинстве своем решается на основании опыта и квалификации врачей-клиницистов и лаборантов, их информированности о современных методах обследования, а также состояния клинико-лабораторной базы
конкретного медицинского учреждения. Видимо, это и оказывается причиной проведения по одному и тому же поводу совершенно разноплановых клинико-лабораторных исследований и, соответственно, установления различных диагнозов, что, в свою очередь, приводит к назначению неправомерных лечебных процедур со всеми вытекающими последствиями.
Упорядочение и регламентация наиболее высокоэффективных методов детекции возбудителя - одна из основных задач "инфекционной патологии".
Авторы, на основании многолетнего опыта работы в области инфекций, передаваемых половым путем (ИППП), и ассоциированных заболеваний, посчитали необходимым внести свой вклад в решение этой актуальнейшей проблемы.
В данной монографии предпринята попытка систематизации всех современных методов лабораторной диагностики, с учетом их эффективности, удобства в работе, достоверности получаемых результатов, возможностей интерпретации, сопоставимости с клинической картиной заболевания. Значительное внимание уделено техническим и "смысловым" ошибкам, возникающим при постановке диагноза в лаборатории, условиям, необходимым для проведения тех или иных исследований, безопасности в работе и другим факторам, влияющим на результат обследования.
Книга написана для врачей-лаборантов и научных сотрудников, занимающихся инфекциями, передаваемыми половым путем, и ассоциированными заболеваниями. В то же время, на наш взгляд, она будет весьма полезна специалистам в области микробиологии и молекулярной биологии, инфекционистам и клиницистам различного профиля, а также студентам старших курсов медицинских и биологических вузов.
Авторы будут благодарны специалистам, которые после ознакомления с этим изданием выскажут им свои соображения и пожелания.
Основополагающие принципы клинико-лабораторного обследования пациентов с венерическими заболеваниями (ныне называемых инфекциями, передаваемыми половым путем), начали разрабатывать лишь во второй половине XIX века.
Этому способствовало то обстоятельство, что отсутствие идентификации возбудителей различных инфекций не давало возможности бороться с эпидемиями неизвестных заболеваний, приводящих к гибели сотен тысяч людей. С другой стороны, в это время, благодаря усилиям голландских и немецких мастеров, появились светооптические микроскопы, с помощью которых можно было рассматривать мельчайшие объекты - микроорганизмы, Несколько позже были разработаны методы выращивания микроорганизмов: культуральный метод (бактериологическая диагностика), в том числе культура тканей и клеток.
Благодаря развитию микробиологии и техническому прогрессу в начале XX века сложились определенные подходы к установлению возбудителей наиболее распространенных на тот период венерических заболеваний: сифилиса, гонореи, трихомониаза, и была доказана этиологическая роль Т. pallidum, N. gonorrhoeae, T. vaginalis в развитии инфекционного патологического процесса.
Упорные, многолетние исследования привели к обнаружению огромного числа микроорганизмов, вызывающих воспалительные заболевания мочепожк вых органов - так называемых патогенных или условно-патогенных возбудителей: хламидий, мико- и уреаплазм, грибов, вирусов (ВПГ, ЦМВ, ВПЧ и др.).
Одновременно расширялся и усложнялся "арсенал" методов детекции возбудителей: появились так называемые серологические методы выявления возбудителей в крови и других биологических жидкостях и тканях; наряду со светооптическими микроскопами начали использовать (в 60-е - 70-е гг. XX века) люминесцентную и фазово-контрастную микроскопию, а для идентификации вирусов, хламидий, трепонем- иммунофлюоресценцию. Все это послужило толчком к пониманию морфологической организации возбудителей ИППП, объяснению патогенеза заболеваний и позволило создать оптимальные методы терапии.
Вместе с тем желание специалистов получить наиболее достоверную информацию о наличии возбудителей ИППП, их патогенности (вирулентности), взаимодействию с другими (патогенными, условно-патогенными, комменсальными) микроорганизмами, грибами, простейшими, а также клетками-эукариотами - привело к созданию совершенно новой методологии: электронной микроскопии (включая метод ультратонких срезов, негативное контрастирование, сканирующую микроскопию, ультрацитохимию). Одновременно разрабатывались и модифицировались разнообразные серологические методы исследования, направленные на изучение антительного ответа при сифилисе: реакции связывания (фиксации) комплемента (РСК), реакции микропреципитации (РМП), реакции Ланге, Кана, Закса-Витебского, Колмера, разнообразные реакции агглютинации, иммунного прилипания и др. Значительная часть из них в настоящее время имеет историческое значение и на практике не применяется, однако они послужили основой разработки схем лабораторного обследования пациентов с подозрением на сифилис.
Определенной вехой в развитии сифилидологии стали реакция иммуно-флюоресценции (РИФ: РИФа6с и РИФ200), а также реакция иммобилизации бледных трепонем (РИБТ или РИТ), считавшиеся лучшими ("золотым стандартом" и "реакцией экспертизы") фактически до 1970-х гг., когда были созданы иммуноферментный анализ (ИФА), реакция пассивной ге-магглютинации (РПГА) и их модификации, с успехом используемые во всем мире.
Таким образом, специалисты в области лабораторной диагностики получили огромный набор методов детекции возбудителей ИППП:
- микроскопические (бактериоскопические);
- культуральные (бактериологические);
- серологические.
Однако, для надежной диагностики многих заболеваний и идентификации их возбудителей этого оказалось явно недостаточно.
Дело в том, что ряд таких методов, например микроскопические, обладают невысокой чувствительностью, весьма субъективны, критичны к забору материала и условиям проведения реакции (окраска, обесцвечивание и др.), а также требуют весьма высокой квалификации специалистов при интерпретации результатов исследований; другие - сложны при реализации, длительны, трудоемки (особенно для диагностики трихомониаза, вирусных инфекций); кроме того, ряд патогенных микроорганизмов (трепонемы, некоторые вирусы, хламидии) не растут на питательных средах; следовательно, этот метод диагностики для их детекции неприемлем; третьи - в основном направлены на детекцию возбудителей методом так называемого антительного ответа и являются косвенными; кроме того, эти реакции даже после окончания полноценной терапии длительное время (месяцы и годы) остаются положительными.
Назрела необходимость в новых методах, обеспечивающих прямую детекцию возбудителей ИППП и обладающих высокой эффективностью (чувствительностью, специфичностью, воспроизводимостью), а также позволяющих одновременно (в одной биопробе) проводить исследование нескольких возбудителей ИППП и, при необходимости, условно-патогенных микроорганизмов.
Этому в полной мере соответствует разработанный в 1985 г. (К. Mullis) молекулярно-биологический метод амплификации нуклеиновых кислот (АНК), так называемая полимеразная цепная реакция (ПЦР). Приблизительно в это же время появись и другие генно-инженерные методы - лигазная цепная реакция (ЛЦР), а также ДНК-зонды и ДНК-гибридизация. Это в значительной мере позволило оптимизировать и унифицировать детекцию возбудителей ИППП и ассоциированных с ними заболеваний. В настоящее время для большинства патогенных и условно-патогенных возбудителей (бактерии, вирусы, грибы, простейшие) созданы так называемые "праймеры", разработаны условия проведения реакций и выпускаются (в России и за рубежом) тест-системы (наборы), с помощью которых диагностические исследования осуществляются непосредственно в клиническом материале.
Продолжаются научно-прикладные исследования с целью создания оптимальных методов прямой детекции возбудителей в реальном времени: SDA-амплификация, NASBA и др. Высокая технологичность амплификационных методов диагностики, на наш взгляд, позволит решить проблему обследования детей, особенно девочек, а также беременных путем исследования материала (мочи), полученного неинвазивными методами.
Другими словами, методы амплификации нуклеиновых кислот являются в современной медицине и биологии наиболее перспективными. Они могут при массовых обследованиях в очагах с высоким уровнем инфицированности в значительной мере заменить в качестве скринингового теста дорогостоящий, трудоемкий, длительный культуральный, а также низкочувствительный и субъективный микроскопический методы.
Вместе с тем небольшой срок применения ПЦР-анализа (наиболее распространенного в России) для диагностики ИППП и ассоциированных заболевании, недостаточная информированность о нем лабораторных работников, инертность врачей-лаборантов, а также не всегда высокое качество производимых в России наборов и практически полное отсутствие внешнего контроля за проведением исследований сдерживают широкое внедрение этого метода в клинико-лабораторную практику.
Таким образом, в настоящее время для идентификации возбудителей ИППП и ассоциированных заболеваний используют разнообразные методы: микроскопические, культуральные, серологические, молекулярно-биологические, каждый из которых имеет множество вариантов и модификаций. Такой набор методов, казалось бы, должен гарантировать возможность выбора и достоверность лабораторного диагноза.
Однако, на практике во многих случаях происходит совершенно обратное: отсутствие информации о качестве выпускаемых наборов и степени их регламентированности, трудночитаемые инструкции к ним, сложности в интерпретации результатов и невозможность сопоставления одних методов исследования с другими, а также с клинической картиной заболевания не позволяют в полной мере воспользоваться достижениями научной мысли.
Сложилась парадоксальная ситуация - появление новых и усовершенствование "старых" методов идентификации возбудителей в определенной степени затрудняют постановку адекватного диагноза в лаборатории.
Решение этой проблемы состоит в совокупности научно-прикладных, организационных, информационных (доступность материалов по вопросам диагностики) мероприятий, повышении квалификации лабораторных работников, улучшении оснащенности лабораторий и качества проводимых исследований, а также в обеспечении постоянной "обратной связи" клиницистов и лаборантов на всех этапах обследования и ведения пациентов с инфекционной патологией.
Рекомендуем
Артикул 00813666
